层析纯化监控分析

在生物制药下游工艺中,通常需要进行一步或者多步的层析才能使蛋白质达到纯化要求。

optek在线光度计和电化学传感器是专业用于在线检测和过程控制的仪表。它们可以帮助用户提高层析分离效果,制定更具体的收集标准,增加产出,同时,还能提高产品质量。

柱前检测

ACF60在线电导率计,附带一个温度传感器,配合PF12 pH传感器,可以提供实时在线的电导率、温度、pH值。

柱后层析监测

纯化过程中,为了产量最大化、产品精确地收集、确保蛋白/DNA片段纯度,准确、可靠、可重复的柱后测量是非常必要的。

一般把单波长的AF45或双波长的AF46紫外传感器直接安装在层析系统的出液口,能大大提高分离工艺的效率。这种在线监测手段,不但能确保产品的纯度,而且大大减少了离线测试的次数和手动分析的误差。

带校准适配器的双通道紫外吸收传感器AF46-VB

一套NIST可追溯性校准滤光片可以帮助用户快速、反复地对传感器进行校准。

optek 的六电极,四极点的ACF60电导率仪与一个pH电极可 以装在同一个流通池里,这样可以确保流通池里的驻流量最低。ACF60的测量量程很大,这样,只用一个电导率仪就可以完成缓冲液与清洗工艺切换过程的监控,而通过PF12 传感器里的pH电极所测的pH值,可以对胶体包装进行调整。此外,还可用于对层析中的平衡过程进行监控,以及用来确保层析柱的完整性。

双波长应用

optek ACF60电导率仪和PF12 pH电极共用一个流通池

主波长主要用于测量蛋白浓度,如用280 nm 的光谱来监控收集,同时使用另一个波长的光,如300 nm,确保在介质浓度很高时还有读数,从而获得完整的曲线,不会像280 nm 那样出现平头峰。

双波长的好处就是当产品的OD值很低时,280 nm的光谱能提供较高的分辨率,精确告诉用户何时开始产品收集,何时应该结束收集;当洗脱过程析出高浓度样品时,就可以使用另一个波长来监控洗脱过程。254/280nm双波长吸收比用来评估蛋白的纯度和核酸(DNA/RNA)的污染情况。

由于optek在线传感器的模组化设计,可以提供不同的光程长(OPL)。根据产品浓度的高低,选择合适的OPL,可以达到最佳的重复性和线性。

C8000 控制器 – 1个高精度控制器,可以同时接5个传感器,提供8个测量结果

在层析分离过程中,需要提供以下测量值:

柱前监测:

所有传感器安装在一个流通池内,拥有极低的介质驻流量

  • 电导率(optek ACF60传感器)
  • 温度(optek ACF60传感器)
  • pH值(optek PF12传感器)

柱后监测:

所有传感器安装在两个流通池内,拥有极低的介质驻流量

  • 双波长紫外光度计(optek AF46)
  • 电导率(optek ACF60)
  • 温度(optek ACF60)
  • pH(optek PF12)

optek C8000型多功能控制器

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